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flowchart TD A([Inicio]):::startEnd --> B([Muestra de sangre seleccionada]):::startEnd B --> C{{Parte 2: Extracción de ADN de sangre}}:::decision

C --> D[Se tomaron 200 μL de sangre total<br/>y se transfirieron a un tubo estéril]:::process
D --> E[Se agregaron 20 μL de Proteinasa K<br/>al fondo del tubo]:::buffer
E --> F[Se añadieron 200 μL de buffer<br/>de lisis AL y se mezcló en vortex<br/>por 15 seg]:::buffer

F --> G{{Incubar a 56 °C durante 10 min<br/>para lisis completa}}:::decision
G --> H[Se agregaron 200 μL de etanol<br/>absoluto y se mezcló nuevamente<br/>en vortex por 15 seg]:::buffer

H --> I[Se transfirió la mezcla a la<br/>columna de sílice y se centrifugó<br/>a 8.000 g por 1 min]:::process
I --> J[Se descartó el filtrado y se<br/>colocó la columna en un tubo nuevo]:::process

J --> K{{Lavados de la columna}}:::decision
K -->|Lavado 1| L[Se agregaron 500 μL de buffer AW1<br/>y se centrifugó a 8.000 g por 1 min]:::buffer
K -->|Lavado 2| M[Se agregaron 500 μL de buffer AW2<br/>y se centrifugó a 14.000 g por 3 min]:::buffer

L --> N[Se descartó el filtrado]:::process
M --> N

N --> O[Se transfirió la columna a un<br/>tubo de elución limpio]:::process
O --> P([Se adicionaron 50 μL de buffer<br/>de elución AE y se dejó 2 min<br/>a temperatura ambiente]):::startEnd
P --> Q[Se centrifugó a 8.000 g por 1 min<br/>para recuperar el ADN]:::process
Q --> R([Análisis de concentración y<br/>pureza en NanoDrop]):::startEnd

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classDef decision fill:#FCE38A,stroke:#B58900,stroke-width:1px,color:#000
classDef process fill:#C7E89E,stroke:#3E7C17,stroke-width:1px,color:#000
classDef buffer fill:#A9D6E5,stroke:#1E6091,stroke-width:1px,color:#000

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